Vedelikkromatograafia tagasilöögiklapi kassett rubiinkeraamiline alternatiiv Watersile

Millal tagasilöögiklappi vahetada?
① Süsteemi töötamise ajal ilmuv teade „Lost Prime“ näitab, et süsteemi rõhk on liiga madal, palju madalam kui tavalise vedelikkromatograafia jaoks vajalik vasturõhk. Selle peamine põhjus on pumba peas oleva tagasilöögiklapi saastumine või tagasilöögiklappi jäänud väikesed mullid, mis põhjustavad ebaühtlast infusiooni. Sellisel juhul peame proovima väikesed mullid viieminutilise „Wet Prime“-režiimiga eemaldada. Kui see lahendus ebaõnnestub, tuleb tagasilöögiklapp eemaldada ja puhastada ultraheliga üle 80 ℃ veega. Kui korduv puhastamine ei anna tulemusi, on soovitatav tagasilöögiklapi padrun välja vahetada.

② Kui süsteemi rõhk oluliselt kõigub, selgub, et pumba peas või tagasilöögiklapis on mulle. Mullide eemaldamiseks suure voolukiirusega võime kasutada märgprimimist 5–10 minutit. Kui ülaltoodud meetod ei tööta, tuleb tagasilöögiklapp eemaldada ja ultraheliga üle 80 ℃ veega puhastada. Kui korduv puhastamine ei anna tulemusi, on soovitatav tagasilöögiklapi padrun välja vahetada.

③ Kui süsteemi sissepritse reprodutseeritavusega on probleeme, tuleb kõigepealt jälgida retentsiooniaega. Retentsiooniaja probleemide korral kontrollige, kas süsteemi rõhu kõikumine on normaalne või mitte. Tavaliselt peaks voolukiirusel 1 ml/min instrumendi süsteemi rõhk olema 2000–3000 psi. (Suhtarvude erinevused sõltuvad kromatograafiliste kolonnide ja liikuvate faaside tüübist.) Rõhu kõikumine on normaalne, kui see jääb 50 psi piiresse. Tasakaalustatud ja hea süsteemi rõhu kõikumine on 10 psi piires. Liiga suure rõhu kõikumise korral tuleb arvestada tagasilöögiklapi saastumise või mullide võimalusega ning seejärel sellega tegeleda.

Millal kasutada keraamilist tagasilöögiklappi?
Rubiinist tagasilöögiklapi 2690/2695 ja teatud atsetonitriili kaubamärkide vahel on ühilduvusprobleem. Konkreetne olukord on järgmine: kui kasutada 100% atsetonitriili, jätta see üleöö seisma ja jätkata katseid järgmisel päeval, siis pumbast ei tule vedelikku. Selle põhjuseks on asjaolu, et rubiinist tagasilöögiklapi korpus ja rubiininkuul on pärast puhtasse atsetonitriili leotamist kokku kleepunud. Me peaksime tagasilöögiklapi eemaldama ja seda kergelt koputama või ultraheliga töötlema. Kui tagasilöögiklappi raputades kostab kerget heli, tähendab see, et tagasilöögiklapp normaliseerub. Nüüd pange tagasilöögiklapp tagasi. Katseid saab tavaliselt läbi viia pärast 5-minutilist "märgprimimist".

Selle probleemi vältimiseks järgnevates katsetes on soovitatav kasutada keraamilist tagasilöögiklappi.